Общие принципы определения ПЦР в Real-Time

Раздел анализы, п

В молекулярной биологии, ПЦР в реальном времени (Real-Time, количественный ПЦР) — лабораторный метод, основанный на методе ПЦР, используется для одновременной амплификации и измерения количества заданной молекулы ДНК. Метод ПЦР в реальном времени включает в себя одновременно детекцию и околичествление (измерение непосредственно количества копий, либо измерение копий относительно внесенной ДНК или дополнительных калибровочных генов) специфической последовательности ДНК в образце.

Этот метод, в общем, использует общие принципы ПЦР и основное отличие состоит в том, что измеряется количество амплифицированной ДНК в реальном времени после каждого цикла амплификации. Для околичествления используют два метода — флюоресцентные красители, интеркалирующие в двуцепочечные молекулы ДНК и модифицированные дезоксинуклеотиды, которые флюоресцируют после гибридизации с комплементарными участками ДНК. Часто ПЦР в реальном времени комбинируют с ОТ-ПЦР (обратная транскрипция) для измерения малых количеств мРНК, что позволяет исследователю получать количественную информацию о содержании данной мРНК в клетке и, соответственно, позволяет судить об уровне экспрессии данного гена в отдельной клетке или ткани.

4 варианта ответа по ВПЧ

(скрининговый тест, с дифференцировкой всего лишь одного типа вируса – 16 типа)

1. «не обнаружен»: это означает, что из перечисленных выше типов ни один тип папилломавируса не обнаружен;
2. «обнаружен вирус 16 типа»: это означает, что из перечисленных выше одиннадцати типов обнаружен только один тип – 16 тип вируса папилломы;
3. «обнаружен»: в данном случае обнаружены один или  несколько типов вирусов из перечисленных одиннадцати (количество обнаруженных типов неизвестно, поскольку тест скрининговый), но не обнаружен 16 тип;
4. «обнаружен, в том числе вирус 16 типа»: в данном случае обнаружены один или несколько типов вируса папилломы человека (количество обнаруженных типов по-прежнему неизвестно), здесь также обнаружен еще и 16 тип.